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無血清細胞凍存液的操作方法主要包括細胞的收集、離心、凍存液的加入、分裝、凍存以及后續的解凍與復蘇等步驟。以下是詳細的操作方法：一、細胞的收集與離心細胞收集：使用常規方法收集處于對數生長期的懸浮細胞或貼壁細胞。對于貼壁細胞，可以使用胰酶或EDTA等試劑進行消化，使其從培養瓶或培養板表面脫落，然后收集到試管或離心管中。細胞離心：將收集到的細胞懸浮液置于離心管中，進行離心處理以收集細胞沉淀。離心條件通常為1,0002,000rpm，4℃，持續35分鐘。注意，離心時應確保溫度適宜，以...

蛋白酶K，屬于一種廣譜蛋白酶，由白色念珠菌（Candidaantarctica）發酵產生。它能夠在較寬的pH值范圍內（pH4-12）保持活性，且在高溫條件下（65℃）仍能穩定工作，這種穩定性使蛋白酶K能夠在多種實驗條件下發揮其作用，成為科研人員手中的得力助手。在分子生物學領域，蛋白酶K的應用尤為廣泛。在DNA提取過程中，蛋白酶K能夠高效地降解細胞和組織中的蛋白質，包括那些與DNA緊密結合的組蛋白，從而釋放出純凈的DNA，為后續的PCR擴增、測序等實驗提供高質量的DNA模板。此...

提到蛋白提取，大家不約而同會想到RIPA裂解液，裂解液加入樣品中，離心即可完成蛋白的提取。然而RIPA裂解液我們真的用對了嗎？RIPA裂解液是從動物細胞或組織中提取蛋白的常用裂解液，其工作原理是利用去污劑（表面活性劑）裂解細胞膜和核膜，從而獲取細胞和組織中的RIPA可溶性蛋白。RIPA裂解液的選擇RIPA裂解液中主要包含去污劑，緩沖體系，等滲體系，變性劑、穩定劑等。其中去污劑是細胞裂解液中重要成分，是由疏水尾端基團和極性親水頭端基團組成的兩性分子，它們能夠降低水的表面張力，所...

蛋白質濃度測定是用于計算純化方法的回收率的重要方法。常用的測定方法包括雙縮脲法、Lowry法、紫外吸收法、BCA蛋白濃度檢測法等。其中常用的方法就是BCA法。BCA全稱是BicinchoninicAcidAssay，也叫SmithAssay，這個方法是由PaulK.Smith發明的。這個方法通過展示不同濃度樣品的顏色變化來判斷蛋白的濃度。檢測原理BCA是一種堿性的水溶性復合物，性質穩定。在其提供的堿性環境下，蛋白質可以將BCA試劑中的Cu2+還原為Cu+，Cu+繼而與BCA試...

在現代生物技術領域，DNA電泳技術已成為一種實驗手段。它廣泛應用于基因克隆、基因突變檢測、DNA序列分析等領域。而DNA電泳套裝則是進行這項實驗的工具。本文將為您詳細介紹DNA電泳套裝的組成、原理及其在生物科研中的應用。一、DNA電泳套裝的組成DNA電泳套裝主要包括以下幾部分：電泳儀：用于提供穩定的直流電源，使DNA分子在電場作用下發生遷移。電泳槽：一般為矩形或梳子形狀，用于裝載電泳凝膠。電泳凝膠：由聚丙烯酰胺或瓊脂糖等物質制成，是DNA分子遷移的載體。凝膠制備試劑：包括凝膠...

黑膠蟲是一種生物還是非生物，學術界至今還有爭議，這里暫且將其認作是一種微生物。黑膠蟲往往來源于血清，是一種常見的細胞污染物，與細胞共生，隨細胞傳代而傳代，通常抗生素對其無效。黑膠蟲與細胞競爭性生長，對細胞生長不利，嚴重時導致細胞死亡。目前很多細胞存在被黑膠蟲污染的現象，對細胞培養及其后續實驗造成了極大地影響。黑膠蟲特征?培養基和正常培養基沒有區別；?低倍鏡下是黑色的點點和細胞碎片沒有區別；?高倍鏡下可以觀察到點狀片狀的游動小體，能模仿細胞碎片和細胞分泌物做布朗運動；?與細胞的...